ТОМ 48 (2006), № 5, c. 410-417
УЧАСТИЕ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА В ДИФФЕРЕНЦИРОВКЕ ПОПЕРЕЧНОПОЛОСАТЫХ МЫШЦ МЫШЕЙ mdx

В. М. Михайлов, Е. В. Евтифеева, В. Б. Сериков, А. Е. Переверзев, А. В. Карманова, В. В. Зенин

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
электронный адрес: vmikhailov@mail.cytspb.rssi.ru

В предварительных опытах было показано, что мышцы мышей mdx, спасенных после рентгеновского облучения в дозе 7.5 Гр внутривенным введением клеток костного мозга мышей C57BL/6, через 2-3 мес обнаруживают признаки усиления дифференцировки поперечнополосатых мышечных волокон. Для доказательства участия стволовых клеток в этом явлении были поставлены эксперименты с клетками костного мозга трансгенных мышей C57BL/6, экспрессирующих зеленый люминесцирующии белок GFP. Первая серия экспериментов была выполнена на химерных мышах C57BL/6 и mdx. Химерных мышей получали введением клеток костного мозга трансгенных мышей C57BL/6, экспрессирующих белок GFP, мышам C57BL/6 или mdx после рентгеновского облучения 5 в дозе Гр. Через 2 мес у мышей-химер повреждали М. quadriceps femoris и еще через 4-5 нед изучали присутствие в мышце GFP-положительных мышечных волокон. У мышей-химер C57BL/6 доли GFP-положительных мышечных волокон для опытной и контр латеральной мышц составили 0.3 ± 0.5 и 0.2 ±0.3 % соответственно. У мышей-химер mdx доли GFP-положительных мышечных волокон в опытной и контрольной группах были 1.7 ± 0.4 и 0.5 ± 0.3 % соответственно. Во второй серии экспериментов клетки костного мозга мышей C57BL /6, экспрессирующих белок GFP, после предварительного истощения вводили внутримышечно мышам C57BL/6 и GFP. Предварительно клетки костного мозга вьщеляли на 63%-ном Перколпе и затем эту фракцию истощали от дифференцированных гемопоэтических клеток магнитным способом на системе Dynal смесью антител против антигенов CD4, CDS, CD38, CD45R, Terll9, Ly-6G и F4/80. После истощения 2.5 · 105-4.0 · 105 клеток инъецировали в 8-9 точек М. quadriceps femoris мышей C57BL/6 или mdx. Через 2-3 нед у мышей C57BL/6 было обнаружено 0.15 ± 0.40 и 0.1 ± 0.2 % GFP-положительных мышечных волокон в опытной и контр латеральной мышцах соответственно. У мышей mdx доли GFP-положительных мышечных волокон составили 2.0 ± 0.8 и 1.2 ± 0.6 %. Результаты указывают на то, что участие стволовых клеток костного мозга в дифференцировке поперечнополосатых мышц мышей mdx может быть достигнуто после внутримышечной трансплантации клеток костного мозга при помощи инъекций.

Ключевые слова:  GFP-экспрессирующие стволовые клетки костного мозга, дифференцировка, регенерация, скелетные мышцы, мыши-химеры C57BL/6 и mdx


Back    Contents    Main