ПЕРЕДАЧА РИБОСОМНОГО ХРОМАТИНА В МИТОЗЕ КЛЕТОК ЭМБРИОНАЛЬНОЙ ПОЧКИ СВИНЬИ (ЛИНИЯ СПЭВ)
В. Н. Стефанова, 1, 2 С. Ю. Демин 2
1 Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения
сельскохозяйственных животных РАСХН, Санкт-Петербург-Пушкин, и
2 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: vestefan@mail.ru
Ядрышковые организаторы (ЯОР) млекопитающих содержат гены рРНК, ассоциированные с аргентофипьными белками, и
могут быть специфично окрашены серебром. Эти гены формируют кластеры в четырех покусах мета- и субметацентрических
хромосом 8-й и 10-й пар в кариотипе линии СПЭВ. Согласно нашим ранее опубликованным данным, ЯОР гомолога 8а
хромосомы 8 содержит амплификацию рДНК, которая после серебрения хромосом проявляется как аномально большой
Ag+-ЯОР. Изучали влияние такой избыточной рДНК на содержание Ag-негативного рибосомного хроматина в
кариотипе. Был проведен морфометрический анализ Ag+-ЯОР хромосом из прометафазных пластинок с модальным
числом хромосом. Обнаружено, что в индивидуальном наборе более длинный гомолог 10L хромосомы 10 всегда
содержит более крупный Ag+-ЯОР, чем более короткий гомолог 10S. Таким образом, кариотип СПЭВ
содержит две пары гетероморфных ЯОР: 8а и 8, 10L и 10S. Половина проанализированных наборов
хромосом содержала четыре Ag+-ЯОР, другая половина имела один Ag-негативный ЯОР, который со сходной
частотой принадлежал либо хромосоме 8, либо 10S. Большая часть прометафазных Ag+-ЯОР была
частично или полностью расщеплена на хроматиды, что позволило измерить площадь Ag+-ЯОР (сестринских)
хроматид. Отношение площадей большего к меньшему Ag+-ЯОР хроматиды сильно варьировало для всех хромосом
набора, за исключением 8а. Максимальное значение этого отношения достигало 5.1 для хромосомы 8, 3.4 и 2.3 - для
10L и 10S (против 1.6 для 8а). Хромосом с отношением, равным 1.25 и выше, было найдено среди
хромосом: 8а - менее четверти, 10L и 10S - около половины, 8 - более двух третей. Эти данные
указывают на то, что прогрессивная дифференциация сестринских хроматид по содержанию Ag-негативного рибосомного
хроматина может привести к неравному распределению Ag+-ЯОР между дочерними клетками. Проверка этого
предположения была осуществлена на двухмерных (2D) препаратах растянутых клеток СПЭВ, полученных без гипотонической
обработки живых клеток, которая приводит к одинаковому уровню серебрения ЯОР и "проядрышек" в раннетепофазных
фиксированных клетках. Обнаружено, что для некоторых дочерних ядер таких клеток характерно расщепление
Ag+-ЯОР, равное 4 : 3 вместо обычного 4 : 4. Комплементарные данные были получены методом 2D FISH с
пробой 28S + 18S рДНК норки. Показано, что раннетелофазные покусы рДНК выявляются в виде четырех ярко
флуоресцирующих пятен, которые по своим размерам и форме близки Ag+-ЯОР соответствующих клеток. В
некоторых случаях, однако, одно из дочерних ядер содержало три таких домена и один тусклый линейный FISH-сигнал,
который, по-видимому, представлял собой не серебрящийся ЯОР. Установлено, что Ag+-ЯОР хромосомы 8а,
самому крупному в кариотипе СПЭВ, присущ высокий уровень когезии и (или) скрученности сестринских хроматид, что
характерно для про фазных, но не прометафазных хромосом данной линии клеток. Эти наблюдения и литературные данные,
приведенные в статье, свидетельствуют об обогащенности Ag+-ЯОР хромосомы 8а неактивным и (или)
малоактивным позднореплицирующимся хроматином.
Ключевые слова: конверсия гетерохроматина, наследуемый транскрипционный сайпенсинг ("глушение"),
гетерохроматизация, рибосомный хроматин, ядрышковые организаторы, 2D FISH
Back
Contents
Main
