МИКРО ТРУБОЧКИ НЕОБХОДИМЫ ДЛЯ ВТЯГИВАНИЯ ЛАМЕЛЛЫ В КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТКАХ VERO
Е. А. Добринских,1,* И. А. Воробьев 2
1 Кафедра клеточной биологии и гистологии биологического факультета Московского государственного
университета и 2 Институт физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского, Москва;
* электронный адрес: eadobrinsk@mail.ru
Методом видеомикроскопии с усилением контраста исследовали изменение поведения фибробластоподобных клеток Vero
при воздействии на них 2,3-бутандион моноксима (BDM) и участие структур цитоскелета в этом процессе. BDM является
ингибитором полимеризации актина на активном крае в клетках BS-C-1 и Swiss3T3 (Yarrow et al., 2003) и вызывает
втягивание ламеллы в клетках PtK2 (Cramer, Mitchison,, 1995). Следовательно, он является удобным инструментом для
влияния на систему актиновых филаментов в клетке. Воздействие BDM приводит к постепенному уменьшению площади
соприкосновения клеток с субстратом - через 5 мин воздействия клетки подтягивают ламеплу, а через 60 мин площадь
клеток уменьшается примерно на 70 %. При этом пучки актина деполимеризуются, а сеть микротрубочек, напротив,
становится более плотной. Если частично разрушить систему актиновых филаментов, воздействуя на клетки латрункулином В
в концентрации 5 нМ, клетки практически не изменяют своей формы и система микротрубочек остается интактной, однако
под воздействием BDM такие клетки втягивают ламеллы значительно быстрее. Если депопимеризовать микротрубочки
нокодазолом, то площадь клеток уменьшается примерно на 20 % и пучки микрофиламентов гипертрофируются. В отсутствие
микротрубочек под воздействием BDM клетки не изменяют своей формы и пучки актина депопимеризуются медленнее, чем в
присутствии микротрубочек. Через 1 ч пучки актина остаются гипертрофированными. Полностью пучки актиновых филаментов
разрушаются через 24 ч после начала воздействия в 90 % клеток. Если после совместного воздействия нокодазола и BDM
удалить из среды инкубации нокодазол, то ламеллы клеток начинают поджиматься через б мин, что соответствует времени
частичного восстановления системы микротрубочек. Полученные данные позволяют заключить, что в процессе ретракции
ламеллы клеток Vero ведущую роль играют микротрубочки, но не стресс-фибриллы.
Ключевые слова: сокращение клеток, ламелла, актин, микротрубочки, 2,3-бутандион моноксим, нокодазол
Back
Contents
Main
