ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ИНТЕРФАЗНЫХ ДОМЕНОВ ГОМОЛОГИЧНЫХ Х-ХРОМОСОМ ЧЕЛОВЕКА
С. Ю. Демин,1 В. Н. Стефанова 1, 2
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, и 2 Всероссийский научно-исследовательский институт
генетики и разведения сельскохозяйственных животных РАСХН, Санкт-Петербург-Пушкин, Россия;
электронный адрес: vestefan@mail.ru
По молекулярным данным, интерфазные домены гомологичных Х-хромосом человека резко отличаются друг от друга по содержанию инактивированного
конденсированного хроматина. Однако, по данным цитологических измерений на препаратах 3D FISH, они мало различаются по размерам. Для того чтобы понять это
противоречие, исследовали дифференциацию интерфазных доменов Х-хромосом на препаратах 2D FISH. Был разработан способ приготовления препаратов интерфазных
ядер для 2D FISH, в котором исключен этап предобработки клеток гипотоническим раствором солей, нивелирующей различия по конденсации хроматина. Препараты
для 2D FISH получали из ассоциированных клеток ФГА-стимулированных лимфоцитов, подвергнутых 1 -минутной предфиксационной обработке изотоническим
раствором белков сыворотки крови с пластификатором. Полученные препараты содержали кластеры лимфоцитов с уплощенными слабо растянутыми интерфазными
ядрами, хроматин которых был хорошо расправлен. Показано, что дифференциация интерфазных доменов гомологичных Х-хромосом по размеру, слабо выраженная на
препаратах 3D FISH, резко усиливается на препаратах 2D FISH, полученных предложенным способом. Подробно представлен современный взгляд на Х-инактивацию
в ХХ-клетках млекопитающих и человека как на парадигму эпигенетики.
Ключевые слова: Х-инактивация, транскрипционный сайленсинг, конденсированный хроматин, ФГА-стимулированные лимфоциты человека
|
