НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ СТАТУСА МЕТИЛИРОВАНИЯ МЕТАФАЗНЫХ ХРОМОСОМ У ЗАРОДЫШЕЙ ЧЕЛОВЕКА ДОИМПЛАНТАЦИОННЫХ
СТАДИЙ РАЗВИТИЯ
В. С. Баранов,1 А. А. Пендина,1 Т. В. Кузнецова,1
О. А. Ефимова,2 И. Д. Федорова,1
О. А. Леонтьева,3 В. С. Корсак,3 Н. Н. Никольский 4
1 Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта РАМН,
Санкт-Петербург, 2 Кафедра генетики и селекции С.-Петербургского государственного университета,
3 Международный центр репродуктивной медицины и
4 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия;
электронный адрес: pendina@mail.ru
Описаны особенности динамики метилирования метафазных хромосом из бластомеров триплоид-ных доимплантационных
зародышей человека. Иммуноцитохимическую детекцию 5-метилцитозина проводили с помощью моноклональных антител (АТ5-МЦ).
Сравнительный анализ характера метилирования метафазных хромосом из ФГА-стимулированных лимфоцитов пуповинной крови и
бластомеров 2-8-клеточных зародышей позволил установить гипометилированное состояние хромосом ранних эмбрионов. При этом для
большинства хромосом начиная с 2-клеточной стадии и до стадии бластоцисты характерно гемиметилированное состояние, обусловленное,
вероятно, пассивной потерей метилирования после каждого раунда репликации во время первых делений дробления. Большинство
хромосом зародышей на этих стадиях имеет точечные сигналы специфического окрашивания АТ5-МЦ, и лишь для некоторых характерно
наличие ярко выраженных сегментов. На отдельных гемиметилированных хромосомах были выявлены сестринские хроматидные обмены.
Типичные для лимфоцитов гиперметилированные сегменты (М-сегменты) были зарегистрированы на некоторых хромосомах зародышей
начиная со стадии 8 бластомеров. Рисунок М-сегментации хромосом на стадии морулы-бластоцисты тождествен или приближается к
таковому в лимфоцитах пуповинной крови. Установлены различия в статусе метилирования гомологичных хромосом на ранних стадиях
делений дробления, при этом для двух гомологов из триады, наиболее вероятно, отцовского происхождения характерно
гипометилированное состояние. Показано гипометилирование прицентромерного гетерохроматина хромосом 1, 9 и 16 в бластомерах
ранних зародышей по сравнению с гиперметилированным состоянием этих участков в лимфоцитах и других эмбриональных тканях.
Такая особенность может свидетельствовать об особом функциональном статусе прицентромерного гетерохроматина в раннем эмбриогенезе
человека.
Ключевые слова: метилирование ДНК, эмбриогенез человека, доимплантационные эмбрионы человека, метафазные
хромосомы, гетерохроматин, триплоидия
|
