У свободноживущей амебы Amoeba proteus после диск-электрофореза надосадочной жидкости гомогенатов в ПААГ и
при использовании в качестве субстрата 1-нафтилфосфата (рН 9.0) были выявлены "медленные", "средняя" и "быстрая" фосфатазы.
"Медленные" фосфатазы кроме 1-нафтилфосфата способны гидролизовать 2-нафтилфосфат и n-нитрофенилфосфат. Они слегка
активируются ионами Mg2+, полностью ингибируются тремя хелатирующими агентами (ЭДТА, ЭГТА и 1,10-фенантролином),
L-цистеином, додецилсульфатом натрия и ионами Fe2+, Zn2+ и Мn2+ (50 мМ), значительно инактивируются
ортованадатом натрия, молибдатом аммония, смесью для ингибирования фосфатаз № 2, n-нитрофенилфосфатом, неорганическим фосфатом,
дитиотреитолом и мочевиной и лишь частично ингибируются H2О2, DL-фенилаланином, 2-меркаптоэтанолом, смесью для
ингибирования фосфатаз № 1 и ионами Са2+. Имидазол, L-(+)-тартрат натрия, окадаевая кислота, NaF и сульфгидрильные
реагенты - n-(оксимеркури)бензоат и N-этилмалеимид - не оказывают никакого влияния на активность "медленных" фосфатаз.
"Средняя" и "быстрая" фосфатазы в отличие от "медленных" не инактивируются тремя хелатирующими агентами. "Средняя" фосфатаза
отличается от "быстрой" меньшей устойчивостью к воздействию мочевины, ионов Са2+ и Мn2+, фосфатов и
H2О2 и большей устойчивостью к дитиотреитолу и тартрату, но главным образом тем, что она активируется
L-цистеином, тогда как "быстрая" ингибируется им. Из 5 испытанных ионов (Mg2+, Zn2+, Mn2+,
Cu2+ и Са2+) только ионы Zn2+ реактивируют "медленные" фосфатазы, инактивированные после
воздействия ЭДТА, но не полностью, а в незначительной степени. Следовательно, из трех фосфатаз амеб, выявляемых при рН 9.0, только
"медленные" являются Zn-металлоферментами и могут считаться щелочными фосфатазами (КФ 3.1.3.1).
Ключевые слова: амеба Amoeba proteus, щелочная фосфатаза
