ВЫЯВЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЛАМИНИНА В СОСТАВЕ ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ МЕМБРАН КЛЕТОК АСЦИТНОИ
ГЕПАТОМЫ ЗАИДЕЛА КРЫСЫ
И. И. Тюряева,1, * О. А. Миргородская,1 О. А. Черепанова,1
Е. П. Подольская,1
А. В. Новиков,2 М. А. Ходорковский,3 В. А. Иванов 1
1 Институт цитологии РАН, 2 Институт аналитического приборостроения РАН и
3 Государственный институт прикладной химии, Санкт-Петербург, Россия;
* электронный адрес: reducer@mail.ru
Проблема дисдифференцировки клеток при неопластической трансформации является ключевой проблемой клеточной биологии и
онкологии. Антигенная дивергенция опухолевых клеток, которая выражается в появлении антигенов, свойственных нормальным тканям, но не
гомологичным данной опухоли, - одно из типичных проявлений дисдифференцировки. Ранее в составе белков плазматической мембраны
гепатоцеллюлярных опухолей крыс, гепатоцитов крыс, подвергшихся канцерогенному воздействию, и регенерирующей печени крыс были обнаружены
компоненты, являющиеся органоспецифическими для почки крысы. В настоящей работе показано, что основным компонентом плазматических мембран клеток
асцитной гепатомы Зайдела, реагирующим с органоспецифической антипочечной сывороткой в иммуноблоте, является белок с мол. массой около
200 кДа, реагирующий также и с иммуносывороткой против ламинина-1. Mace-спектрометрический анализ протеолитических фрагментов
трипсинолиза, проведенного в кусочке полиакриламидного геля с изучаемым компонентом, обнаружил пептиды, принадлежащие β1-, β2-
и α4-цепям ламинина. Выявляемый в иммуноблоте с помощью антиламининовой сыворотки компонент с мол. массой около 180 кДа был также
подвергнут масс-спектрометрическому анализу, который обнаружил содержание в нем γ1-цепи ламинина. В асцитической жидкости и сыворотке
крыс с развитой асцитной гепатомой обнаружено достоверное по сравнению с сывороткой нормальных крыс увеличение уровня ламинина. Показано
появление ламинина и на поверхности гепатоцитов, выделенных из печени крыс на 4-е сут после однократной инъекции им гепатоканцерогена
N-диэтилнит-розамина (ДЭНА). Таким образом, впервые выявлены и идентифицированы опухолеассоциированные антигены в составе плазматических
мембран клеток гепатомы Зайдела, являющиеся специфическими для почек крысы. Полученные результаты позволяют сделать выводы о том, что
под влиянием канцерогена ДЭНА в печени происходит синтез ламинина, который характерен и для гепатоцеллюлярной опухоли - гепатомы
Зайдела.
Ключевые слова: канцерогенез, гепатома Зайдела, гепатоциты, ламинин, масс-спектрометрия
|
