АНТИАПОПТОТИЧЕСКИЙ ОНКОГЕН bcl-2 ИНДУЦИРУЕТ ПРОГРАММУ СТАРЕНИЯ В ТРАНСФОРМАНТАХ Е1А+c-Ha-ras ПОСЛЕ
ДЕЙСТВИЯ АДРИАМИЦИНА
А. М. Нелюдова,1 С. Г. Зубова, Н. Д. Аксенов, В. А. Поспелов, Т. В. Поспелова
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербуг, Россия;
1 электронный адрес: annanelioudova@hotmail.com
Введение гена bcl-2 в трансформированные онкогенами E1А и c-Ha-ras эмбриональные фибробласты
крысы, которые обладают высокой проапоптотической чувствительностью и не останавливаются в клеточном цикле после повреждающих
воздействий, приводит не только к подавлению клеточной гибели, но и к восстановлению способности реализовать блоки клеточного
цикла после повреждения ДНК и в условиях сывороточного голодания. По данным проточной цитометрии, трансформанты Е1А + c-Ha-ras
+ bcl-2 способны осуществлять долговременный (не менее 5 сут) блок клеточного цикла на границе фаз G1/S после
обработки ДНК-интеркалятором адриамицином. Кривая клеточного роста показала, что число клеток остается постоянным на протяжении
1 нед культивирования Bcl-2-экспрессирующих трансформантов в среде, содержащей адриамицин. Эффективность клонирования клеток
Е1А + c-Ha-ras + bcl-2 равна нулю уже через 16 ч после добавления адриамицина. Апоптотическая гибель, которую выявляли по
олигонуклеосомной фрагментации ДНК, а также клеточная гибель по типу митотической катастрофы после обработки адриамицином
практически отсутствуют у Bcl-2-экспрессирующих трансформантов по сравнению с родительской линией E1 A + c-Ha-ras. Введение
гена bcl-2 в трансформанты E1A + c-Ha-ras сопровождается увеличением активности SA β-Gal (senescence associated
β-galac-tosidase), которая считается маркером клеточного старения. Обработка адриамицином трансформантов E1A + c-Ha-ras +
bcl-2 приводит к еще большему росту активности SA β-Gal по сравнению с необработанными клетками. Методом коиммунопреципитации
обнаружено, что присутствие Bcl-2 приводит к формированию комплексов Bcl-2 с онкопродуктами раннего района Е1А, который, согласно
современным представлениям, отвечает за проапоптотическую чувствительность Е1А-экспрессирующих трансформантов. Полученные данные
позволяют предположить, что перенос гена bcl-2 в трансформанты Е1А + c-Ha-ras вызывает переключение программы клеточной
гибели на программу старения после действия ДНК-повреждающих агентов, что может происходить благодаря взаимодействию Bcl-2 с
активатором апоптоза - вирусным онкобелком Е1А.
Ключевые слова: трансформация, блок клеточного цикла, старение, bcl-2, E1A, c-Ha-ras,
адриамицин
Back
Contents
Main
|
