ЦИТОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ПОЛИМОРФНОЯДЕРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И НОРМАЛЬНЫЕ
КЛЕТКИ IN VITRO И IN VIVO
М. М. Поцелуева, А. В. Пустовидко, Е. В. Ковалева, Ю. В. Шаталин, Ю. В. Евтодиенко
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущина,
и Пущинский государственный университет, Россия;
электронный адрес: potselueva@iteb.ru
Ряд работ, в том числе и наши исследования, подтверждают важную роль полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) при развитии
асцитных опухолей. Методом люминолзависимой хемилюминесценции (ХЛ) было показано наличие двух функционально различных пулов ПМЯЛ в
организме опухоленосите-ля: праймированных, циркулирующих в кровеносном русле, и активированных ПМЯЛ, способных к спонтанной ХЛ и локал
изованных в зоне роста опухоли. Целью настоящей работы было сравнить цито-токсическое воздействие праймированных и активированных ПМЯЛ на
клетки опухолей (асцитной карциномы Эрлиха и асцитной гепатомы Зайдела) при сокультивировании, а также на нормальные клетки организма - э
ритроциты in vitro и in vivo. При стимуляции ПМЯЛ форбол-1, 2-миристат-1, 3-ацетатом (ФМА) эффективно повреждались клетки о
пухолей только в первые 24 ч, до наступления апоптоза ПМЯЛ. При дальнейшем сокультивировании наблюдалось увеличение числа клеток
опухоли, так как выделения ПМЯЛ повреждающих агентов - реактивных форм кислорода (РФК) - прекращается. Этот факт подтверждает участие
ПМЯЛ в противоопухолевой защите. Оба пула ПМЯЛ вызывали эффективное подавление роста опухоли in vitro при стимуляции
хемотаксическим пептидом (fMLP), так как в данном случае цитотоксичность обусловлена действием как РФК, так и протеолитических
ферментов. При росте опухоли многократно увеличивается РФК-генерирующая активность ПМЯЛ (Поцелуева и др., 1999), что может вести к
повреждению не только опухоли, но и нормальных клеток организма. Поэтому мы исследовали цитотоксическое действие ПМЯЛ на эритроциты
крысы in vitro и in vivo. При их совместном культивировании in vitro скорость лизиса эритроцитов праймированными
ПМЯЛ при стимуляции ФМА увеличивается многократно по сравнению с нормой. fMLP-стимулированная цитотоксичность в 1.5-2.0 раза выше
контроля. Активированные ПМЯЛ без стимуляции способны вызывать частичный лизис эритроцитов. Для оценки цитотоксического действия
ПМЯЛ на эритроциты in vivo исследовали содержание гемоглобина в эритроцитах и плазме крыс в процессе роста опухоли. Содержание
гемоглобина в эритроцитах в ходе роста опухоли снижается от 135 ± 10 до 85 ± 5 г/л, в то же время в плазме крови содержание гемоглобина
постепенно увеличивается примерно в 2 раза. На основании полученных результатов можно предположить, что одной из причин гибели
организма-опухоленосителя может быть цитотоксическое действие ПМЯЛ на нормальные клетки организма, обусловленное гиперпродукцией РФК.
Ключевые слова: полиморфноядерные лейкоциты, асцитные опухоли, хемолюминесценция, праймирование, цитотоксичность
|
