ВЛИЯНИЕ СИНТЕТИЧЕСКОГО ИНГИБИТОРА ПРОТЕАСОМ MG132 НА ДИНАМИКУ ЭНДОЦИТОЗА
ЭФР-РЕЦЕПТОРНЫХ КОМПЛЕКСОВ В КЛЕТКАХ А431
М. С. Меликова, А. А. Аксенов, Н. Н. Никольский, Е. С. Корнилова1
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия;
1 электронный адрес: lenkor@mail.cytspb.rssi.ru
Исследовали зависимость эндоцитоза ЭФР-рецепторных комплексов в клетках эпидермоидной карциномы
человека линии А431 от активности протеасом. Протеазную активность подавляли с помощью синтетического ингибитора MG132.
Методом субклеточного фракционирования органелл в градиенте 17 %-ного Перколла продемонстрировано, что добавление MG132
к клеткам через 15 мин после стимуляции эндоцитоза ЭФР приводит к незначительному накоплению части интернализованного
125I-ЭФР в ранних эндосомах на поздних сроках эндоцитоза и к гораздо более выраженной аккумуляции меченого
ростового фактора в поздних эндосомах и(или) лизосомах по сравнению с необработанными клетками. Выход продуктов деградации
125I-ЭФР в инкубационную среду в присутствии MG132 значительно (в 3-12 раз) подавляется. Однако биохимический
анализ показал, что в норме сам рецептор в эндосомах не является мишенью протеасом, поскольку он выявляется во фракциях
ранних и поздних эндосом и лизосом в виде полноразмерного белка с нативной мол. массой (170 кДа). Обсуждаются возможные
механизмы влияния MG132 на внутриклеточный процессинг ЭФР-рецепторных комплексов.
Ключевые слова: рецептор ЭФР, тирозинкиназа, эндоцитоз, ранние эндосомы, поздние эндосомы, лизосомы,
мультивезикулярные тела, деградация, протеасомы, ингибитор протеасом MG132, убиквитинирование, деубиквитинирование,
клетки эпидермальной карциномы человека линии А431
Back
Contents
Main
