ТОМ 46 (2004), № 3, c. 249-256

ИССЛЕДОВАНИЕ СРАВНИТЕЛЬНОГО УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКОВ В СИНХРОНИЗИРОВАННЫХ НА РАЗЛИЧНЫХ СТАДИЯХ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТКАХ XL2 Р. Э. Узбеков Отдел электронной микроскопии Научно-исследовательского института физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова; электронный адрес: rustuzbekov@aol.com Культивируемые клетки линии XL2 (Xenopus laevis) были синхронизированы комбинированным воздействием сывороточного голодания, обработкой афидиколином, нокодазолом и ALLN. Были получены 4 популяции клеток с преимущественным содержанием клеток в G1-, S- и G2-фазах и митозе соответственно. С помощью количественного иммуноблотинга в экстрактах, полученных из синхронизированных популяций клеток, было определено сравнительное содержание шести различных белков: бета-тубулина, ДНК-топоизомеразы IIα, киназы семейства Аврора A pEg2, кинезин-подобного ассоциированного с МТ белка-мотора XlEgS и белков конденсинового комплекса pEg7 (XCAP-D2) И ХСАР-Е. В работе описывается метод математической обработки данных, позволяющий определить уровень экспрессии белков в гипотетических клеточных популяциях, состоящих исключительно из клеток одной из фаз клеточного цикла. Предлагаемый метод позволяет использовать для анализа динамики изменения количества белков даже лишь частично синхронизированные клеточные культуры, при условии точного определения доли клеток всех фаз клеточного цикла. Ключевые слова:  клеточный цикл, синхронизация клеток, экспрессия белков Back    Contents    Main