ТОМ 46 (2004), № 12, c. 1080-1090
ТРАНСКРИПЦИЯ ГЕНА c-fos И ДНК-СВЯЗЫВАЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА АР-1 УВЕЛИЧИВАЮТСЯ В РЕЗУЛЬТАТЕ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ КЛЕТОК ЭМБРИОНАЛЬНОЙ КАРЦИНОМЫ МЫШИ ЛИНИИ F9

И. А. Чуйкин,1 М. С. Лянгузова, В. А. Поспелов

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия;
1 электронный адрес: viliatchuikin@mail333.com

В настоящей работе с помощью ретардации в ПААГ было показано, что дифференцировка клеток F9 сопровождается увеличением ДНК-связывающей активности транскрипционного фактора АР-1, взаимодействующего с сайтами связывания из промоторов генов коллагеназы и c-jun. Специфичность связывания транскрипционных комплексов с ДНК была подтверждена конкуренцией в присутствии избытка немеченых олигонуклеотидов. Применение специфических антител позволило установить, что в состав комплексов входят белки c-Fos/c-Jun и c-Jun/ATF-2 (supershuft). С помощью метода RT-PCR установили, что транскрипция генов раннего ответа c-fos и c-jun увеличивается при дифференцировке клеток F9. Как в дифференцированных, так и в недифференцированных клетках F9 стимуляция сывороткой активирует транскрипцию генов c-fos и c-jun. Добавление ингибиторов гистондеацетилаз бутирата натрия (NaBut) и трихостатина (TSA) в среду культивирования вызывало замедление пролиферации клеток F9 и увеличение транскрипции гена c-fos, что показывает вклад структуры хроматина в негативную регуляцию.

Ключевые слова:  клетки эмбриональной карциномы F9, фактор АР-1, c-fos, дифференцировка, гистондеацетилазы


Back    Contents    Main