САТЕЛЛИТНАЯ ДНК БЫКА ИНДУЦИРУЕТ ГЕТЕРОХРОМАТИНИЗАЦИЮ ХРОМОСОМНОЙ ДНК
В КЛЕТКАХ ТРАНССАТЕЛЛИТНОЙ МЫШИНОЙ ЭМБРИОНАЛЬНОЙ ТЕРАТОКАРЦИНОМЫ
И. О. Сучкова,1 Т. В. Баранова,1 М. Е. Кустова,1
Т. В. Кислякова,2 В. Б. Васильев,1 Н. О. Сломинская,1 Н. В. Аленина,2, 3
Е. Л. Паткин1*
1 Институт экспериментальной медицины РАМН, 2 Институт цитологии РАН,
Санкт-Петербург, и 3 Центр молекулярной медицины Макс-Дельбрюк, Берлин, Германия;
* электронный адрес: Patkin@EP4686.spb.edu
Проведена трансформация клеток мышиной эмбриональной тератокарциномы F9 фрагментом (3.8 т. п. н.) сателлитной ДНК
IV быка (Сат), которая не гомологична сателлитной ДНК мышей. При помощи FISH-анализа обнаружено, что в различных
транссателлитных клонах Сат интегрируется в различные участки хромосом. В одной из транссателлитных линий наблюдалась
тенденция к распределению Сат вдоль несущей ее хромосомы. Интегрированные Сат последовательности были обогащены
однонитевыми протяженными участками ДНК, выявляемыми при помощи FISH без предварительной денатурации хромосомной ДНК.
Можно предположить, что такие участки являются интермедиатами неравных сестринских хроматидных обменов, ведущих к
указанной амплификации Сат в несущей ее хромосоме. Интегрированная Сат была неметилированной, что было показано при
помощи метил-чувствительной ПЦР. Окрашивание DAPI показало, что интегрированная Сат ведет к формированию заметных
эктопических неогетерохроматиновых блоков в районах, граничащих с интегрированной Сат. Такого рода блоки
располагались только между интегрированной Сат и центромерным гетерохроматином. Таким образом, повторяющаяся
центромерная ДНК мыши (обогащенная AT и специфически окрашивающаяся DAPI) "распространяется" вдоль хромосомы в ответ
на интеграцию сателлитной ДНК быка богатой ГЦ. Полученные результаты обсуждаются с точки зрения возможных механизмов
эффекта положения в недифференцированных клетках, обусловленного экспансией повторяющихся последовательностей ДНК.
Ключевые слова: формирование гетерохроматина, нестабильность сателлитной ДНК, транссателлитные
клетки, эмбриональная тератокарцинома, однонитевые районы ДНК, FISH
Back
Contents
Main
|
