АНАЛИЗ МАР-КИНАЗНЫХ КАСКАДОВ У ТРАНСФОРМАНТОВ, РАЗЛИЧАЮЩИХСЯ ПО СПОСОБНОСТИ
ОСУЩЕСТВЛЯТЬ БЛОК КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА НА ГРАНИЦЕ ФАЗ G1/S ПОСЛЕ СЫВОРОТОЧНОГО ГОЛОДАНИЯ
И. А. Савельева,* Т. В. Быкова, Н. Д. Аксенов, В. А. Поспелов, Т. В. Поспелова
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
* электронный адрес: savir@freemail.ru
Проведен анализ работы основных ветвей МАР-киназного каскада в трансформантах Е1А + Е1В-19кДа и Е1А +
c-Ha-ras, полученных из эмбриональных фибробластов крысы (ЭФК) путем переноса в них разных пар комплементирующих
онкогенов. Исследована способность клеток регулировать активность основных компонентов МАР-киназного каскада -
протеинкиназ ERK1,2, JNK1,2 и р38 - при культивировании в условиях сывороточного голодания. Показано, что при
трансформации содержание неактивных киназ повышается и не зависит от типа комплементирующего онкогена. Однако
степень фосфорилирования киназ в трансформантах зависит от типа комплементирующего онкогена, в особенности для
киназ ERK1.2. Выявлен необычный двухфазный характер изменения содержания фосфорилированных форм ERK1.2 в
контрольных фибробластах и трансформантах Е1А + Е1В-19кДа, способных останавливаться в фазе G1 клеточного цикла
после культивирования на бессывороточной среде. При этом в течение 15-30 мин после удаления сыворотки
фосфорилированные формы ERK1,2 практически не выявляются, а через несколько часов их содержание восстанавливается
до контрольных значений. Однако в трансформантах Е1А + c-Ha-ras содержание фосфорилированных форм ERK1,2 в
условиях сывороточного голодания не меняется в течение всего времени культивирования на бессывороточной среде.
Значительных изменений в содержании фосфорилированных форм стресс-киназ JNK2 и р38 при сывороточном голодании не
было обнаружено ни в нормальных, ни в трансформированных клетках. Обсуждаются возможные механизмы двухфазного
характера изменения содержания фосфорилированных форм киназ ERK1.2 в контрольных фибробластах и трансформантах
Е1А + Е1В-19кДа, способных останавливаться в клеточном цикле при сывороточном голодании.
Ключевые слова: эмбриональные фибробласты крысы, трансформанты Е1А + Е1В-19кДа и Е1А + c-Ha-ras,
МАР-киназный каскад, киназы ERK1,2
Back
Contents
Main
