БЕЛКИ ЯДРЫШКОВОГО МАТРИКСА С МОЛ. МАССАМИ 40 И 27 кДа ПЕРЕНОСЯТСЯ В СОСТАВЕ
ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО ХРОМОСОМНОГО МАТЕРИАЛА
М. И. Мурашева (Косых), Ю. С. Ченцов *
Биологический факультет Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова,
Москва, Россия;
* электронный адрес: yuchentsov@mail.ru
Иммунофлуоресцентным методом показано, что сыворотки М-311 и К-30 от аутоиммунных больных связываются
с интерфазными ядрами и митотическими хромосомами клеток культуры СПЭВ. Методом иммуноблотинга в сыворотке М-311
обнаружены антитела к полипептиду с мол. массой 40 кДа, а сыворотка К-30 содержит антитела к полипептиду с мол. массой 27 кДа.
Антитела к этим белкам в интерфазных ядрах локализовались в кариоплазме, причем одни из них (к белку 27 кДа) диффузно и в
виде мелких ярких гранул, а вторые (40 кДа) в виде небольших четко очерченных гранул. Оба белка выявляются также по периферии
ядрышек в виде сплошного кольца. Во время митоза эти белки связаны с митотическими хромосомами: белок с мол. массой 27 кДа
располагается отдельными неправильными группами, а белок с мол. массой 40 кДа выявляется на периферии хромосом. При
искусственной деконденсации ядер и хромосом антитела к обоим белкам окрашивают интерфазные ядра диффузно, а в
митотических клетках локализуются на поверхности набухших хромосом. При возврате интерфазных клеток в изотонические
условия локализация этих белков такая же, как в норме, и ядрышки вновь окружены тонким флуоресцирующим ободком.
Исследуемые белки сохраняют прочную связь с хромосомами как в норме, при гипотонической деконденсации, так и при
последующей реконденсации в изотонической среде. Для выявления ядерного белкового матрикса клетки обрабатывали
2 М NaCl, ДНКазой I и РНКазой А, удаляющими ДНК, РНП и гистоны. После этого антитела к изучаемым белкам окрашивали
только периферию ядрышек интерфазных клеток; в зоне кариоплазмы флуоресценция отсутствовала. Это говорит о том, что из
всех компонентов ядерного матрикса (ламина, внутренняя белковая сеть, остаточное ядрышко) эти белки (с мол. массами 27 и 40
кДа) входят в состав периферии остаточных ядрышек. Из представленных данных можно сделать вывод о том, что белки
ядрышкового периферического матрикса переносятся к клетке периферическим хромосомным материалом, так же как и
основные белки ядрышка (фибрилларин, В-23 и др.) и некоторые неядрышковые белки ядерного матрикса (NMP65).
Ключевые слова: хромосома, митоз, ядрышко, ядерно-белковый матрикс, иммунохимия, гипотония
Back
Contents
Main
