ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСТОЯННЫХ ЛИНИЙ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА
Т. А. Крылова,1 В. В. Зенин,1 Н. С. Мусорина,1
В. С. Баранов,2
Н. К. Бичевая,2 В. С. Корсак,2 Н. Н. Никольский,1 Г. П. Пинаев,1
Г. Г. Полянская 1 *
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург и 2 Институт акушерства и гинекологии
им. Д. О. Отта РАМН, Санкт-Петербург, Россия;
* электронный адрес: poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
Проведено длительное (5-8 мес) культивирование эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) человека,
выделенных из предимплантационных бластоцист, получаемых при искусственном оплодотворении. Был получен ряд
характеристик, подтверждающих статус постоянных линий ЭСК человека. Культивируемые ЭСК прошли от 100 до 175
удвоений клеточной популяции. Время удвоения популяции ЭСК равно 37.0+1.5 ч. Полученные постоянные линии ЭСК,
названные HESC-1, HESC-2, HESC-3 и HESC-4, культивируются на митотически инактивированном фидерном слое мышиных
эмбриональных фибробластов (постоянная клеточная линия STO), растут преимущественно в виде многослойных колоний
разной формы. Эти линии сохраняют такие свойства, как стабильная пролиферативная активность, высокая активность
щелочной фосфатазы, экспрессия транскрипционного фактора Oct4, которые характеризуют ЭСК разного происхождения.
Экспрессия поверхностных антигенов, свойственных только ЭСК человека (SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-81 и TRA-1-60), была
подтверждена иммунофлуоресцентньш анализом с использованием соответствующих моноклональных антител.
Дополнительным подтверждением видовой принадлежности линий HESC является отсутствие экспрессии поверхностного
антигена SSEA-1, свойственного только ЭСК мыши. Исследовано распределение недифференцированных клеток и
эмбриоидных телец линии HESC-1 по фазам клеточного цикла.
Back
Contents
Main
|
