УЗНАВАНИЕ ВНУТРЕННИХ ПОВТОРОВ (TTAGGG)n ТЕЛОМЕРНЫМ БЕЛКОМ TRF1И ЕГО РОЛЬ В ПОДДЕРЖАНИИ
СТАБИЛЬНОСТИ ХРОМОСОМ В КЛЕТКАХ КИТАЙСКОГО ХОМЯЧКА
Р. И. Крутилина,1 А. Н. Смирнова,1 О.С. Myдрак,1
М. П. Светлова,1
Н. М. Плескач,1 Ш. Л. Оси,2 Е. М. Бредбери,3, 4
А.О. Заленский,3
Н. В. Томилин 1
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия,
2 Институт биохимии свободного университета г. Берлина, Берлин-Дахлем, Германия,
3 Кафедра биохимии медицинской школы Университета г. Девиса, Девис, Калифорния, США, и
4 Лос-Аламосская национальная лаборатория, Лос-Аламос, Нью-Мексико, США;
электронный адрес: raya@mail.cytspb.rssi.ru
Теломеры млекопитающих содержат длинные тандемные повторы (TTAGGG)n, которые защищены сложными
белковыми комплексами, формирующимися на этих повторах. У млекопитающих ключевыми белками теломерных комплексов
являются белки TRF1 и TRF2, специфически распознающие повторы (TTAGGG)n и связывающиеся с ними. Оба белка участвуют в
формировании уникальной структуры, получившей название Т-петли, которая изолирует однонитевой конец теломер и с помощью
этого механизма защищает их от воздействия ферментов репарации ДНК, от слияния теломер за счет гомологичной рекомбинации
(ГР), а также препятствуют взаимодействию теломеразы с теломерами. У некоторых видов позвоночных помимо теломерной
локализации встречаются и большие блоки внутренних нетеломерных последовательностей (TTAGGG)n (ВНТП). Так, например,
геном китайского хомячка содержит 18 ВНТП, которые также нестабильны и, по-видимому, должны быть защищены с помощью
механизма, отличного от описанного выше. На данном этапе остается неясным, каков механизм защиты ВНТП и какую роль
играют в этом механизме белки, связывающиеся с ВНТП. В этой работе мы изучали локализацию белка TRF1 в ядрах клеток
китайского хомячка линии V79 и его возможную роль в защите ВНТП. Мы экспрессировали человеческий белок TRF1, сшитый с
"зеленым флуоресцентным белком" (GFP-TRF1), в клетках китайского хомячка линии V79 и обнаружили, что этот белок
взаимодействует с ВНТП в интерфазных ядрах. Нами также установлено, что ионизирующая радиация (ИР) не индуцирует
детектируемое перемещение белка GFP-TRF1 в сайты случайных двухнитевых разрывов. Известно, что TRF1 удаляется из
теломер при сверхэкспрессии танкиразы 1 (TANK1), которая индуцирует поли(АДФ)-рибозилирование этого белка. Мы
трансфицировали клетки V79 плазмидой, кодирующей TANK1, и показали, что частота хромосомных аберраций в них возрастает
независимо от облучения. Обработка клеток V79 вортманнином (WM), ингибирующим ATM-опосредованное фосфорилирование
TRF1, также повышает частоту хромосомных аберраций. Наши результаты позволяют предположить, что белок TRF1 может быть вовлечен в сиквенс-специфическую защиту ВНТП.
Ключевые слова: вортманнин, интерстициальные последовательности (TTAGGG)n, танки-раза 1, TRF1
Back
Contents
Main
|
