НЕДОСТАТОЧНОСТЬ ПРОСТЫХ ФОТОМЕТРИЧЕСКИХ И ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКИХ ПРОЦЕДУР ДЛЯ ОЦЕНКИ
УФ-ИНДУЦИРОВАННОГО МУТАГЕНЕЗА В ГЕНАХ, ОТВЕЧАЮЩИХ ЗА СИНТЕЗ ТРИПТОФАНА В КЛЕТКАХ ESCHERICHIA COLI
С. В. Жеребцов
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Опробован новый метод регистрации индуцированных мутаций, основанный на анализе клеточных экстрактов и
специальных сред после выращивания в них УФ-облученных клеток Escherichia coli. He обнаружено корреляции
между дозой УФ-света и оптической плотностью культуральных сред или клеточных экстрактов, полученных обработкой
Тритоном Х-100. Сложная зависимость голубой флуоресценции концентрированных сред от дозы, полученной клетками,
существенно отличалась от известных кривых доза-эффект для индуцированных мутаций. Тем не менее, интенсивность
коричневой окраски триптофансодержащей среды, вероятно, могла бы служить достаточно чувствительным критерием
интегральной метаболической активности растущих в ней клеток. Кроме того, мы обнаружили, что прозрачность
стационарной бактериальной культуры (обычно достигавшей этой фазы за ночь - так называемая ночная культура)
постепенно увеличивалась в течение 3-4 мин во время измерений в кювете спектрофотометра после разведения свежей
средой.
Ключевые слова: мутагенез, флуоресценция, фотометрия, Escherichia coli
Back
Contents
Main
