ВЛИЯНИЕ ЭТОПОЗИДА И АМСАКРИНА НА ПРОХОЖДЕНИЕ МИТОЗА КЛЕТКАМИ ЛИНИЙ GM-130 И Нер-2.
АНАЛИЗ МЕТОДОМ ЦИТОМЕТРИИ В ПОТОКЕ
А. Н. Шатрова,1, * Н. Д. Аксенов,1 А. И. Полетаев,2
В. В. Зенин 1
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, и
2 Институт молекулярной биологии им. А. В. Энгелъгардта РАН, Москва;
* электронный адрес: shan@linc.cytspb.rssi.ru
На клетках GM-130 и Нер-2 показано, что ингибиторы топоизомеразы II (топо II), стабилизирующие ковалентный
комплекс ДНК-фермент, вызывают накопление клеток с содержанием ДНК 4с. Разработанный нами ранее дифференциальный
анализ распределения клеток по фазам клеточного цикла с использованием цитометрии в потоке (Зенин и др., 2001)
позволяет выделять из суммарной популяции клеток с содержанием ДНК 4с клетки, находящиеся в фазе G2,
метафазные и анафазные клетки, а также клетки, ненормально завершившие митоз и названные нами клетками,
находящимися в псевдо-G1. На асинхронной культуре клеток GM-130 показано, что этопозид при концентрации
1 мкМ вызывает накопление клеток в фазе G2 клеточного цикла, что подтверждается увеличением доли
4с-клеток и падением митотического индекса до нуля, в то время как при концентрации 40 мкМ этопозид вызывает
остановку пролиферации клеток, о чем свидетельствует полное отсутствие и митотических клеток, и накопления клеток с
содержанием ДНК 4с. На клетках GМ-130 и Нер-2, накопленных в митозе действием нокодазола и отмытых от него, показано
появление клеток в псевдо-G1 после добавления 50 мкМ этопозида или 20 мкМ амсакрина. В этом случае
метафазные клетки, минуя анафазу, переходят в псевдо-G1 с содержанием ДНК 4с. В присутствии нокодазола
при концентрации амсакрина 4 или 40 мкМ все митотические клетки переходят в псевдо-G1 в течение 1 ч.
Кратковременная обработка (15 и 30 мин) амсакрином при концентрации 40 мкМ в присутствии нокодазола и последующее
удаление ингибитора и статика приводят к аналогичному переходу в псевдо-G1.
Ключевые слова: анафаза, метафаза, псевдо-G1, цитометрия в потоке
Back
Contents
Main
|
